全自动蛋白分离纯化系统的应用领域
分子筛层析也并非一无是处,其应用领域主要包括以下方面:
1)脱盐:
高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用分子筛层析除去,这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速,蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易失活,样品体积可达柱床体积的25%-30%,为了防止蛋白质脱盐后溶解度降低会形成沉淀吸附于柱上,一般用醋酸铵等挥发性盐类缓冲液使层析柱平衡,然后加入样品,再用同样缓冲液洗脱,收集的洗脱液用冷冻干燥法除去挥发性盐类。
2)分离提纯:
分子筛层析已广泛用于酶、蛋白质、氨基酸、多糖、激素、生物碱等物质的分离提纯。
3)测定高分子物质的分子量:
用一系列已知分子量的标准品放入同一凝胶柱内,在同一条件下层析,记录每一分钟成分的洗脱体积,并以洗脱体积对分子量的对数作图,在一定分子量范围内可得一直线,即分子量的标准曲线。测定未知物质的分子量时,可将此样品加在测定了标准曲线的凝胶柱内洗脱后,根据物质的洗脱体积,在标准曲线上查出它的分子量。
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